适应无血清培养基
许多连续细胞系,如HeLa,CHO-K1或小鼠骨髓廇可能可以适应于缺乏血清的生长环境.适应过程常常是一个很长的选择周期,此间只有细胞群体中的少数被选择出来,因此在此选择过程中确保细胞系的性质不丧失是很重要的.如果是骨髓瘤细胞,其目的是用于制备杂交廇,而如果是CHO细胞则用于做转染实验,因此用无血清培养基的选择培养必须在融合和转染之前进行,使选择过程中丢失特性的危险性降到低.
适应无血清培养基通常要经过几次连续的传代培养,使血清浓度逐渐降低.一旦细胞在某一血清浓度条件下形成稳定的增殖状态,就可用更低浓度的血清将细胞传代培养,直至稳定的生长增殖再次形成,而后再次稀释血清.如果是悬浮培养,要计算活细胞的数量 ,根据活细胞的数量稀释细胞悬液,此时需要保持的低细胞浓度要比正常传代培养所需的细胞浓度高一些.对于单层细胞培养,可在传代培养的前几天先降低培养基中的血清浓度,而后再用新的低浓度培养基进行传代培养.在适应过程中,可能有必要在培养基中添加一些已知的因子来代替血清.
