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大鼠C肽(C-P)酶联免疫ELISA试剂盒
大鼠C肽(C-P)酶联免疫ELISA试剂盒
更新时间:2017-08-13
型    号:48T/96T
所属分类:大鼠ELISA试剂盒
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大鼠C肽(C-P)酶联免疫ELISA试剂盒价格公道、*,售后服务完整,并提供免费代检测服务!需要产品说明书及其它详细信息请直接与我们。

大鼠C肽(C-P)酶联免疫ELISA试剂盒产品概述:

产品名称:大鼠C肽(C-P)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
规格:原装/96T 分装 48T/96T
本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中C肽(C-P)含量。
标本处理及要求
1.血清、血浆标本可直接测定;
2.尿液、脑脊液、腹腔液:2000-3000转/分离心10分钟后,取上清液待测。
3.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
4.采集后尽早进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
自备物品
1 、 37 ℃ 恒温箱
2 、 标准规格酶标仪
3 、 精密移液器及一次性吸头
4 、 蒸馏水
5 、 一次性试管
6 、 吸水纸
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在*、第二孔中分别加标
准品 100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二
孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,
混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各
取 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl,混
匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准
品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,
浓度分别为180ng/L,120ng/L ,60ng/L,30ng/L, 15ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样
品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混
匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。    
4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。
计算
    以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
6.本试剂不同批号组分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.底物请避光保存。
检测范围:
7.5ng/L -250ng/L
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月

 

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