伊红染色液(醇溶)
伊红(Eosin)又称曙红,属人工合成染料中的呫吨类染料,为桃红色或粉红色的粉末
伊红(醇溶)分子式为 C20H8Br4O5,分子量为 649.9。伊红适宜于苏木精配合染色以显示正常或病理组织的形态结构。伊红染色液(醇溶)采用*防腐剂,操作简单,不使用汞、甲醇等有毒试剂。常用于组织切片或培养细胞的染色,染色后细胞浆呈粉红色或红色。
1、系列乙醇
2、4%多聚甲醛
操作步骤(仅供参考):
1、样品处理
a) 对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡 5~10min。
更换新鲜的二甲苯,再脱蜡 5~10min。无水乙醇 5min。
90%乙醇 min。70%乙醇 2min。蒸馏水 2min。
b) 对于冰冻切片:
蒸馏水 2min。
c) 对于培养细胞:
用 4%多聚甲醛固定 10min 以上。蒸馏水洗涤 2 分钟。
更换新鲜的蒸馏水,再洗涤 2min。
2、伊红染色
对于上述处理好的样品,伊红染色液染色 0.5~2min(根据染色结果和要求调整时间)。
如果需要直接观察,可以用 70%乙醇洗涤 2 次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
注:如果用于免疫组化等染色后的复染,参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。
3、脱水、透明、封片或进行其它染色a)脱水、透明、封片:
95%乙醇脱水 2min。
更换新鲜的 95%乙醇再脱水 2min。二甲苯透明 5min。
更换新鲜的二甲苯,再透明 5min。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞浆呈粉红色或红色。
b)进行其它染色:
如果进行免疫荧光染色或进行 Hoechst 等荧光染料的染色,在伊红染色液染色后:
70%乙醇洗涤 2 次,每次 2min。
PBS 或生理盐水或 TBS 或 TBST 等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡 5min。
进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。
注意事项:
1、如果需要脱水、透明和封片处理,需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 个月有效。