CCK-8试剂盒并不是传统意义上的“设备”，而是一种用于检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测试剂盒。它的核心成分是WST-8，在电子耦合剂存在下，可被活细胞内的脱氢酶还原生成水溶性橙黄色甲臜产物。甲臜生成量与活细胞数量呈正相关，通过酶标仪在450 nm波长处测定吸光度，即可间接反映细胞活力、增殖水平或药物毒性。
与传统的MTT法相比，CCK-8试剂不需要使用有机溶剂溶解产物，生成的甲臜可直接溶于培养基，操作更简便，对细胞毒性也较低。它常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性评价、肿瘤药敏试验、生物因子活性检测以及化妆品原料安全性评估等科研场景。
1.主要应用领域
可用于抗肿瘤药物筛选、细胞生长抑制检测、细胞因子诱导增殖实验、干细胞增殖活性评估、化妆品原料细胞毒性检测以及环境污染物对细胞的影响研究。
2.检测原理
WST-8在电子耦合剂作用下被活细胞脱氢酶还原，生成橙黄色水溶性甲臜。颜色越深，通常表示活细胞数量越多；若细胞受到毒性影响，颜色则变浅。该反应可通过酶标仪在450 nm处读取吸光度进行定量。
3.使用方法
将细胞接种至96孔板，贴壁细胞一般每孔1,000—10,000个，白细胞建议不低于2,500个/孔。预培养后加入待测物质，再按培养基体积的10%加入CCK-8溶液，37℃避光孵育1—4小时，最后用酶标仪测定450 nm吸光度。建议设置空白孔、对照孔和实验孔，并采用复孔取平均值。
4.注意事项
加样时应避免产生气泡，气泡会影响OD值读取；96孔板边缘孔易蒸发，可改加PBS或培养基而不用于测定。若待测物质具有氧化性或还原性，可能干扰显色，应设置药物空白对照或在加试剂前更换新鲜培养基。试剂应避光保存，4℃可保存约12个月，-20℃可保存约24个月，避免反复冻融。
总体来看，CCK-8试剂盒是一种操作简便、灵敏度较好、适合高通量检测的细胞活力检测工具。它的结果受细胞接种密度、孵育时间、药物性质、试剂保存状态和酶标仪读数条件影响较大。正式实验前建议先摸索细胞数量和显色时间，并合理设置对照，以保证数据具有参考价值。
