CCK-8试剂盒是一种用于细胞增殖和细胞毒性检测的常用试剂盒。它基于一种水溶性四唑盐（WST-8）的化学反应，广泛应用于细胞活性、增殖、毒性、药物筛选等实验中。 原理
CCK-8试剂盒中的核心成分是WST-8（4-氯-1-甲基-2-苯基-3-（4-硝基苯）-2H-四唑氯化物）。WST-8本身是无色的，在细胞内的NAD(P)H依赖性脱氢酶作用下，它会还原为橙黄色的甲zanazon（formazan）产物。此反应是依赖于活细胞的代谢活性，活细胞内有较高的代谢水平，因此它们能够还原WST-8，而死亡细胞则没有还原能力。通过测量形成的甲zanazon的吸光度（一般在450 nm处），可以间接反映细胞的生长和存活情况。
主要成分
CCK-8试剂盒通常包含：
1.WST-8溶液：用于测量细胞活性。
2.配套缓冲液：维持溶液的稳定性，通常包括PBS等。
使用方法
1.细胞培养：将待测试的细胞接种在96孔板中，培养一段时间，通常是24、48、72小时，根据实验的需要。
2.加入CCK-8试剂：向每个孔中加入一定体积的CCK-8试剂。通常是10μL CCK-8溶液加入到每孔中，具体加入量会根据实验设计进行调整。
3.孵育：将96孔板继续在培养箱中孵育1-4小时（通常是2小时），使得反应充分进行。此时，活细胞会还原WST-8，形成颜色。
4.测量吸光度：使用酶标仪在450 nm波长下测量每个孔的吸光度（OD值）。吸光度值与细胞数目成正比，细胞数目越多，吸光度越高，代表细胞活性越强。
应用领域
1.细胞增殖/生长检测
CCK-8试剂盒常用于检测细胞的增殖情况。例如，可以通过CCK-8检测药物或化学品对细胞增殖的影响，观察它们是否具有抑制或促进细胞生长的作用。
2.细胞毒性检测
通过测定药物或其他处理对细胞存活的影响，CCK-8试剂盒可以用于毒性实验。在一定浓度下，药物的毒性会导致细胞存活率下降，从而降低吸光度。
3.药物筛选和疗效评价
研究人员可以利用CCK-8试剂盒来评估药物的治疗效果，特别是筛选抗癌药物、抗病毒药物等的活性。
4.细胞代谢检测
由于WST-8还原反应依赖于细胞的代谢活性，CCK-8试剂盒也可用于研究细胞的代谢情况。
5.细胞生物学研究
CCK-8试剂盒也常用于实验室中对细胞生物学过程的研究，比如检测细胞周期、细胞分化等过程中的细胞活性变化。
优点
1.高灵敏度：CCK-8试剂盒比传统的MTT法更灵敏，能够检测较低浓度的药物或其他化学物质对细胞的影响。
2.操作简单：使用CCK-8试剂盒不需要有机溶剂、酸性溶液等，实验操作相对简单，且结果稳定。
3.适用性广：可广泛用于不同类型的细胞、不同的实验平台（如96孔板、24孔板等）以及各种生物医药研究领域。
4.无毒性：与MTT试剂盒相比，CCK-8试剂没有毒性，使用后无需进行有毒化学试剂的处理。
CCK-8试剂盒是一种广泛应用于细胞增殖、活性、毒性检测的试剂盒，利用水溶性四唑盐（WST-8）在活细胞代谢的作用下还原形成有色产物，进而通过光度计测量吸光度来评估细胞的生长状况。它的优点在于灵敏度高、操作简便、无毒且无需有机溶剂，是现代细胞实验中不可缺的工具。
