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使用小鼠ELISA试剂盒要知晓的那些事儿
点击次数:937 更新时间:2022-06-23
  小鼠ELISA试剂盒线性范围:指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围.被检样品的含量超出测定线性范围,必须改变样品与试剂体积的比例,重新测定才能得到准确结果.试剂盒的测定线性范围是衡量试剂盒质量的一个指标,也是正确使用该试剂盒的关键之一.
  小鼠ELISA试剂盒的准确度:通常以回收率定值血清的靶值范围,对照试验及干扰试验的结果来分析判断:
  1.非特异性与干扰试验 对维生素C 黄疸 溶血 乳糜等因素的耐受程度,干扰值越小越好.
  2.对照试验 将被检试剂盒与*的参考方法同时测定若干样本,计算两组结果的相关系数和直线回归方程.
  3.回收试验 回收率越接近全部,准确率越高.
  4.定值血清的测定 对于某些无法准确加入标准物的试剂盒,可用低 中 高浓度的定值血清进行测定,测得值符合定值血清的靶值范围为合格。
  小鼠ELISA试剂盒操作进程的控制:
  1、严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
  2、加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作.按说明进程严峻控制操作时间,避免孵育时间人为延伸,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
  3、封板温育时,各孔一定要封严,避免阳性标本的液体蒸发,发作周边现象然后导致“花板”的出现。
  4、用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,elisa试剂盒洗板针疏通,洗完板后在吸水纸挑选洁净无或少尘的吸水材料上轻轻拍干:还要避免针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的进程中易发作拖带现象而导致“花板”的出现。
  5、合理安排检测量,避免反应板过多构成洗板等候时间长。
  6、加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。
  7、显色剂尽量在临用前制作,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
  8、加样时保持显色剂不外流;AB液应避免触摸金属器械,加停止液时应避免发作气泡。
  9、小鼠ELISA试剂盒应保证C清洁,整个操作进程中保证酶标板不触摸次氯酸,以上的办法可以使“花板”降至至低极限。然后提高检测的特异性,并得到更可靠的实验成果。

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