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细胞分离液的特点和操作注意事项你知道吗?
点击次数:1242 更新时间:2022-05-26
  细胞分离液除了可分离淋巴细胞外,更常用于胰岛细胞的分离。胰岛细胞的移植是一种有效的糖尿病新型疗法,可解决特别是I型糖尿病患者的胰岛细胞不足及功能低下的问题。
  细胞分离液特点:
  1、提供多种密度的Biocoll细胞分离液,可分离外周血,骨髓和脐带血中的单个核细胞,低密度的基质细胞,间充质干细胞以及啮齿动物的血细胞等。
  2、生产过程符合GMP以及美国药典标准,无菌即用,内毒素含量低。
  3、分离效果好,所得细胞活性>80%,Ficoll可高压灭菌,有效期长。
  细胞分离液操作步骤及注意:
  1、取全血,使用等量PBS稀释。(全血:HBSS=1:1)
  2、取离心管,加入与血稀释液等量的PBS于管底,将血液稀释液小心加至PBS液面上层。(小心不要使两种溶液混合,吸头接近液面,贴壁缓慢加入,尤其是两种溶液刚接触到的时候,一定要慢!慢!再慢!)
  3、离心:800g,30min,需要将制动降至低,即离心机自然降速至0,离心完毕将得到如图所示分层(一定要自然降速,或者只有1-2成的制动)
  4、吸取白膜层至新15mL离心管中。(白膜层为如图所示部位,一定要小心的吸取,不要吸到血浆和下层的细胞分离液也不要将各层溶液搅混,吸取的时候可以先将上层血浆吸掉,这样更好操作。)
  5、白膜层液体加10~15mlPBS离心,300g,10min,弃上清。沉淀再加PBS清洗一次,弃上清。
  6、沉淀加入正常培养的*培养基进行培养,2~3小时,使单核细胞贴壁。
  7、镜下观察细胞贴壁后,更换培养基,去除未贴壁细胞,保留下来的即为所需的单核细胞。

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